重组人碱性成纤维细胞生长因子(附文献)
- 武汉艾美捷科技有限公司2022年3月25日 3:30 点击:711
重组人碱性成纤维细胞生长因子(附文献)
碱性成纤维细胞生长因子是成纤维细胞生长因子(FGF)家族的成员。FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活活性,参与多种生物学过程,包括胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭。这种蛋白质作为内皮细胞迁移和增殖的调节剂,以及血管生成因子发挥作用。它在体外作为多种中胚层和神经外胚层来源细胞的有丝分裂原,因此被认为参与器官发生。已经描述了编码不同亚型的三种选择性剪接变体。HPR结合生长因子在体内是血管生成因子,在体外是多种细胞类型的有效有丝分裂原。这两种生长因子的组织分布和浓度存在差异。
在大肠杆菌中产生的艾美捷——重组人碱性成纤维细胞生长因子是一个单一的、非糖基化的多肽链,包含154个氨基酸,分子量为17.2kDa。FGF-b通过专有色谱技术进行纯化。
艾美捷重组人碱性成纤维细胞生长因子基本参数:
来源:大肠杆菌。
外表:无菌过滤白色冻干(冻干)粉末。
配方:将蛋白质从浓度为1mg/ml的浓缩溶液中冻干,溶液为20mmTris-HCl,pH7。4和1M氯化钠。
溶解度:建议在不低于100µg/ml的无菌18MΩ-cm H2O中重组冻干的碱性成纤维细胞生长因子,然后将其进一步稀释到其他水溶液中。
稳定性:冻干的成纤维细胞生长因子-2虽然在室温下稳定3周,但应在-18°C以下干燥保存。重组后,FGF-b应在2-7天之间在4°C下保存,以备将来在-18°C以下使用。对于长期储存,建议添加载体蛋白(0.1%HSA或BSA)。请避免冻融循环。
纯度:经SDS-PAGE分析,大于98.0%。
生物活性:由小鼠balb/c 3T3细胞的剂量依赖性增殖计算的ED50<0.1ng/ml,对应于graeter的比活性小于1.0x107单位/mg。
艾美捷重组人碱性成纤维细胞生长因子相关参考文献:
1.Title:Activation of the Hedgehog pathway in pilocytic astrocytomas
2.Title:Phenotype reversion in fetal human liver epithelial cells identifies the role of an intermediate meso-endodermal stage before hepatic maturation
3. Title:Embryonic Stem Cell-Derived Glial Precursors as a Vehicle for Sulfamidase Production in the MPS-IIIA Mouse Brain .
4.Title:Adult Human Dental Pulp Stem Cells Differentiate Toward Functionally Active Neurons Under Appropriate Environmental Cues.
5.Title: Successful implantation of physiologically functional bioengineered mouse internal anal sphincter
来源:https://www.amyjet.com/products/CYT-218.shtml
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Mabtech丨艾美捷 抗小鼠IgG1单克隆抗体
同型对照:
在流式细胞术等实验中,同型对照常被用作阴性对照。同型对照应与分析中使用的分析物特异性抗体的同型相匹配。
小鼠IgG1的同型控制:
Mabtech 艾美捷抗小鼠IgG1单克隆抗体建议作为流式细胞术中的小鼠IgG1亚型对照。它已被用作不同物种细胞的同型对照PF488P共轭单克隆抗体MT128的即用溶液。PF488P由蓝色激光(488 nm)激发。最大激发波长为490nm,最大发射波长为516nm。
Mabtech艾美捷该抗体基本参数:
抗体:MT128
代码:3612-71-100T
大小:100次检测
免疫原:细菌抗原
同型:小鼠IgG1
特异性:细菌蛋白
内容:在无菌过滤(0.2μm)PBS中加入0.2%牛血清白蛋白和0.09%叠丨氮丨化钠的结合抗体即用溶液。
纯化:通过蛋白质G亲和层析从体外培养物中纯化。
接合:MT128抗体已与PF488P接合。
储存:储存在4-8°C或-20°C或更低温度下冷冻。避免反复冷冻/解冻。
应用:流式细胞术中的同型控制。建议使用5μl对100万个细胞进行染色,总体积为50μl。
PF488P由蓝色激光(488 nm)激发。最大激发波长为490nm,最大发射波长为516nm。
用小鼠IgG1同种型对照抗体MT128(虚线)和抗人穿孔素抗体(实线,代码3465-71-100T)染色的人淋巴细胞的轮廓图。细胞在染色前被固定和渗透。直方图来源于前向和侧向光散射中典型淋巴细胞特征的门控事件。流式细胞术在BD FACSVerse系统上进行。
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Mabtech丨艾美捷 抗人载脂蛋白B单克隆抗体
载脂蛋白B(apoB,也称为载脂蛋白B、apoB、apoB-100、apoB100和apoB100)是低密度脂蛋白颗粒(LDL)的主要蛋白质成分,是一种512 kD的水不溶性大分子(apoB-100),主要在肝脏和肠道(apoB-48)中产生。载脂蛋白B被认为是心血管疾病的一个消极因素。ApoB-100通常占人血浆中ApoB的98%,浓度约为0.4-1.3 mg/ml。
对于LDL的细胞内染色,Mabtech 艾美捷建议同时添加固定剂和非离子洗涤剂。
Mabtech艾美捷该抗体基本参数:
抗体:低密度脂蛋白11
代码:3715-7
数量:250μg
免疫原:人类低密度脂蛋白
同型:小鼠IgG1
特异性:天然人低密度脂蛋白
内容物:在无菌过滤(0.2μm)PBS中以1 mg/ml的浓度供应,其中含有0.02%叠氮化钠。
纯化:通过蛋白质G亲和层析从体外培养物中纯化。
浓度:LDL 11已与异硫氰酸荧光素(FITC)结合。
储存:储存在4-8°C或-20°C或更低温度下冷冻。避免反复冷冻/解冻
应用:用于LDL的细胞内免疫荧光染色。建议同时添加固定剂和非离子洗涤剂。
Mabtech相关热门研究:
CODE SIZE REACTIVITY PRICE
3414-3-250 anti-human IL-1α mAbs MT641/642, purified 250 µg
3414-3-1000 anti-human IL-1α mAbs MT641/642, purified 1 mg
3414-6-250 anti-human IL-1α mAb MT513, biotinylated 250 µg
3414-6-1000 anti-human IL-1α mAb MT513, biotinylated 1 mg
3435-3-250 anti-human IL-3 mAb IL3A, purified 250 µg
3435-3-1000 anti-human IL-3 mAb IL3A, purified 1 mg
3435-6-250 anti-human IL-3 mAb IL3B, biotinylated 250 µg
3435-6-1000 anti-human IL-3 mAb IL3B, biotinylated 1 mg
3459-3-250 anti-human EBI3 mAb MT23A14, purifiedSpecific for EBI3 subunit of IL-27, IL-35, IL-39 250 µg
3459-3-1000 anti-human EBI3 mAb MT23A14, purifiedSpecific for EBI3 subunit of IL-27, IL-35, IL-39 1 mg
3520-5-250 anti-human IL-17A mAb MT504, purified 250 µg
3520-5-1000 anti-human IL-17A mAb MT504, purified 1 mg
3522-3-250 anti-human IL-17F mAb MTF1927, purified 250 µg
3522-3-1000 anti-human IL-17F mAb MTF1927, purified 1 mg
3522-4-250 anti-human IL-17F mAb MTF1927, biotinylated 250 µg
3522-4-1000 anti-human IL-17F mAb MTF1927, biotinylated 1 mg
3522-5-250 anti-human IL-17F mAb MTF912, purified 250 µg
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Mabtech丨艾美捷 抗人CD4单克隆抗体
CD4(分化簇4)最初被称为leu-3或T4,是一种单链I型跨膜糖蛋白,表达于白细胞,包括T细胞亚群、B细胞、巨噬细胞和粒细胞。CD4是T细胞受体的共同受体,与抗原呈递细胞表达的主要组织相容性复合物II类的不同区域相互作用。CD4参与胸腺分化和信号转导。它也是人体免疫缺陷病毒的受体。
Mabtech艾美捷 抗人CD4单克隆抗体对人CD4具有特异性,适用于免疫组织化学。单克隆抗体在PBS中提供,不含防腐剂。
Mabtech艾美捷该抗体基本参数:
抗体:CD4-1
代码:3606-1-1000
数量:1000μg
免疫原:受刺激的人类白细胞
同型:小鼠IgG2a
特异性:识别人类CD4
浓度:在无菌过滤(0.2μm)PBS中以1 mg/ml的浓度供应。不含防腐剂。
纯化:通过蛋白质G亲和层析从体外培养物中纯化。
储存:储存在4-8°C或-20°C或更低温度下冷冻。避免反复冷冻/解冻。
应用:该单克隆抗体可用于研究细胞和组织切片中的CD4表达。对于多聚甲醛固定细胞的流式细胞术染色,建议在染色后进行固定和渗透。
Mabtech相关热门研究:
CODE SIZE REACTIVITY
3715-7 anti-human apoB mAb LDL 11, FITC 250 µg
3714-3-250 anti-human apoD mAb D544, purified 250 µg
3714-3-1000 anti-human apoD mAb D544, purified 1 mg
3714-6-250 anti-human apoD mAb D263, biotinylated 250 µg
3714-6-1000 anti-human apoD mAb D263, biotinylated 1 mg
3712-3-250 anti-human apoE mAb E276, purified 250 µg
3712-3-1000 anti-human apoE mAb E276, purified 1 mg
3712-6-250 anti-human apoE mAb E887, biotinylated 250 µg
3712-6-1000 anti-human apoE mAb E887, biotinylated 1 mg
3711-3-250 anti-human apoH mAb H219, purified 250 µg
3711-3-1000 anti-human apoH mAb H219, purified 1 mg
3711-6-250 anti-human apoH mAb H464, biotinylated 250 µg
3711-6-1000 anti-human apoH mAb H464, biotinylated 1 mg
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MyBioSource丨艾美捷 系列3D细胞培养试剂盒
细胞是高等生物有机体一切生命活动的基本单位,个体发育过程中无数功能及形态各异的细胞形成了不同的组织和器官,这个复杂的过程不仅受到遗传物质的调控,更离不开体内三维立体微环境中的各种生长因子、细胞因子、细胞间及细胞与细胞外基质( extracellular matrix,ECM)间相互粘附等多种信号的调节。体外细胞培养技术就是在体外维持细胞、组织和器官生存及生长的一种技术。而传统的体外细胞培养多采用的是2D细胞培养技术,即是将离体的细胞粘附在塑料培养板或玻璃板上,在添加营养物质和细胞因子的培养基中进行单层培养,这种方法虽然操做简便,但是无法模拟具有空间结构的ECM与细胞之间的相互作用,且因为平板附着,细胞会逐渐平面化、异常分化并失去分化表型。2D细胞培养已不能满足细胞正常生长发育所需的局部微环境。
MyBioSource 艾美捷 系列3D细胞培养试剂盒,助力细胞培养的研究。相关研究工具如下:
cat# 名称 应用 支架模型
MBS846802 3D Cell Culture Matrix Alginate Hydrogel Kit 细胞球体形成分析;药物筛选研究 藻酸盐水凝胶
MBS846803 3D Cell Culture Matrix BME Kit 细胞球体形成分析;药物筛选研究 基底膜(BME)基质
MBS846804 3D Cell Culture Matrix Duo-Matrix Kit 细胞球体形成分析;药物筛选研究 专利的Duo-Matrix
MBS846921 3D Cell Culture Ready-to-Use Scaffold Complete Kit 细胞球体形成分析;药物筛选研究;球体分离用于蛋白,生化和细胞分析 天然聚合物干支架
MBS846913 3D Cell Culture Non-Enzymatic Cell Harvesting Kit 球体分离用于蛋白,生化和细胞分析
例:【左】MyBioSource MBS846803(基底膜(BME)基质)&【右】MBS846921(天然聚合物干支架) 结果图:
左图:A图是HepG2和MCF7细胞无支架环境的培养结果,B图是在基底膜(BME)基质中的培养结果:细胞在BME基质中培养21天,形成球体,培养基每2-3天更换一次;C图中的钙黄绿素的染色结果标明细胞在BME基质中培养较长一段时间后,细胞活力不受影响。
右图:A图是HepG2和MCF7细胞无支架环境的培养结果,B图是在3D支架中的培养结果:细胞在3D支架中培养21天,形成球体,培养基每2-3天更换一次;C图中的钙黄绿素的染色结果标明细胞在3D支架中培养较长一段时间后,细胞活力不受影响;D图为96孔板中即用型干支架海绵的图;E图为不含培养基或细胞的干支架:光学显微镜的高倍放大图像显示支架内相互连接的孔(50-200 um 大小);F图在支架中培养21天后,在HEPG2细胞上进行支架解离。解离后没有明显的细胞死亡(红色:EthD-1)。活细胞显示为绿色 (Calcein AM)。
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MyBioSource丨艾美捷 肠激酶活性检测试剂盒
肠肽酶(Enterokinase,EC 3.4.21.9)是一种丝氨酸蛋白酶,参与胰蛋白酶原向胰蛋白酶的激活,进而导致各种消化酶的激活。它识别一个高度特异的氨基酸序列“DDK”,并在赖氨酸残基后裂解。肠肽酶的高比活性已被用于切割含有上述识别基序的多种天然或融合蛋白标签。在PRSS7活性检测试剂盒(荧光法)中,我们使用了一种含有肠肽酶识别序列的肽底物以及荧光标签“AFC”。肠肽酶催化该底物的裂解并释放AFC分子,可通过测量其在Ex/Em=380/500 nm处的荧光来轻松量化AFC分子。该检测试剂盒简单、快速,可检测低至1mU的肠肽酶活性。
MyBioSource 艾美捷 肠激酶活性检测试剂盒--利用含有肠激酶特异性识别序列且带有AFP荧光标记的多肽底物,在肠激酶的催化作用下,该多肽底物被裂解,并释放AFC分子,继而通过测量其在Ex/Em = 380/500 nm的荧光强度,达到检测肠激酶活性的目的。
AFC标准曲线(a)。用人肠肽酶检测试剂盒(b)的灵敏度。按照试剂盒方案进行分析。
MyBioSource 艾美捷该试剂盒化验程序:
1.AFC标准曲线:通过向90µl肠肽酶分析缓冲液中添加10µl 1 mM AFC标准溶液,将AFC标准溶液稀释至100µM(100 pmol/µl)。将0、2、4、6、8和10µl稀释的100µM AFC标准加入96孔板中的一系列孔中,以生成0、200、400、600、800和1000 pmol/孔的AFC标准。用肠肽酶分析缓冲液将最终体积调节至100µl。
2.样品制备:在96孔板的每个孔中加入1-50微升具有肠肽酶活性的样品。将5-10µl肠肽酶(阳性对照)添加到所需孔中。用肠肽酶分析缓冲液将阳性对照和样品孔的最终体积调节至50µl。平行制备带有50µl肠肽酶分析缓冲液的底物背景控制井和带有样品+肠肽酶分析缓冲液的样品背景控制井。
3.反应混合物:混合足够多的试剂,以满足要进行的分析数量。对于每个孔(样品、阳性对照和背景对照),制备50µl混合物,其中包含:
Reaction Mix Background Control Mix
Enteropeptidase Assay Buffer 48 µl 50 µl
Enteropeptidase Substrate 2 µl ---
4.测量:室温下培养30-60分钟,在Ex/Em=380/500 nm下测量荧光。
注:培养时间取决于样品中的肠肽酶活性。建议在动力学模式下测量荧光,并在线性范围内选择两个时间点(T1和T2)来计算样品的肠肽酶活性。AFC标准曲线可在终点模式下读取(即在培养时间结束时)。
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MyBioSource丨艾美捷 肠激酶抑制剂筛选试剂盒
MyBioSource 艾美捷 肠激酶抑制剂筛选试剂盒--利用含有肠激酶特异性识别序列且带有AFP荧光标记的多肽底物,在肠激酶的催化作用下,该多肽底物被裂解,并释放AFC分子,继而通过测量其在Ex/Em = 380/500 nm的荧光强度,在强效肠肽酶抑制剂存在下,底物的水解会受到阻碍,荧光强度会减弱,通过荧光强度的变化,达到筛选肠激酶抑制剂的目的。
MyBioSource 艾美捷该试剂盒组成:
肠肽酶分析缓冲液20毫升
肠肽酶底物0.2ml
人肠肽酶0.17毫升
肠肽酶特异性抑制剂[抑肽酶](0.6 mM)0.1 ml
MyBioSource 艾美捷试剂准备:
1.人肠肽酶:用910µl肠肽酶分析缓冲液重组,获得1mU/µl的溶液。等分保存在-80°C。避免重复冷冻/解冻。在-80°C下稳定2个月。
40 μl Enteropeptidase Assay Buffer
10 μl Enteropeptidase enzyme (1mU/µl)
2.筛选化合物、抑制剂对照品和空白对照品:将候选抑制剂溶解到适当的溶剂中。用肠肽酶分析缓冲液稀释至所需试验浓度的4倍。将25μl稀释试验抑制剂或分析缓冲液添加到肠肽酶孔中,作为样品筛选[S]或酶对照[EC](无抑制剂)。对于抑制剂控制,将10μl肠肽酶特异性抑制剂和15μl肠肽酶分析缓冲液添加到肠肽酶孔中。在室温下培养10-15分钟。
3.肠肽酶底物制备:每个孔制备25μl底物溶液。
23 µl of Enteropeptidase Assay Buffer
2 μl of Enteropeptidase Substrate
混合并向每个孔中添加25µl肠肽酶底物溶液。搅拌均匀。
4.测量:以动力学模式测量荧光30-60分钟(Ex/Em=380/500 nm)。在绘图的线性范围内选择两个时间点(T1和T2),并获得相应的荧光值(RFU1和RFU2)。
MyBioSource 艾美捷该试剂盒存储:
在-20°C温度下存放工具包,避免光线照射。使用前将分析缓冲液加热至室温。在打开之前,以低速(高速不适合酶)短暂离心小瓶子。
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MyBioSource丨艾美捷 牛肠激酶ELISA检测试剂盒
肠激酶(Enterokinase,EK或Enteropeptidase,EP,EC 3.4.21.9)是哺乳动物十二指肠内的一种异源二聚体丝氨酸蛋白酶,分子质量为150ku,由1条115ku的重链和1条35ku轻链组成,两条链通过一对二硫键相连。重链参与EK在消化道细胞膜上的锚定以及与胰蛋白酶的结合,轻链具有催化活性,可以特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列,将胰蛋白酶原活化为胰蛋白酶, 从而启动各种酶原活化的级联。通常EK的切割位点位于赖氨酸之后,不切割识别序列后是脯氨酸的识别位点。由于经EK裂解融蛋白所释放的目的多肽具有和野生型完全一致的N-末端氨基酸序列, 因而可作为蛋白表达体系中融合蛋白的切割试剂。
MyBioSource 艾美捷全种属的牛肠激酶ELISA检测试剂盒--基于双抗夹心ELISA的原理,实现对样本中肠激酶的定量检测。
MyBioSource 艾美捷牛肠激酶ELISA检测试剂盒实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被牛肠激酶(EK)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛肠激酶(EK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
MyBioSource 艾美捷该试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
MyBioSource 相关研究:
cat# 名称 种属 样本类型
MBS108911 Bovine Enterokinase ELISA Kit 牛 未稀释的原始牛血清、血浆或组织匀浆样品
MBS9367104 Rabbit Enterokinase (EK) ELISA Kit 兔子 未稀释的原始兔子血清、血浆或组织匀浆样品
MBS9367174 Mouse Enterokinase (EK) ELISA Kit 小鼠 未稀释的原始小鼠血清、血浆或组织匀浆样品
MBS9365153 Human Enterokinase (EK) ELISA Kit 人 未稀释的原始人血清、血浆或组织匀浆样品
艾美捷科技是MyBioSource的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/MyBioSource.shtml
联系邮箱:kefu@labbase.net
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