艾美捷KRISHGEN BioSystems生物测定试剂盒方案

艾美捷KRISHGEN BioSystems生物测定试剂盒方案

艾美捷KRISHGEN BioSystems ，主要研究生物测定试剂盒，包括残留污染检测试剂盒，药代动力学测定试剂盒，免疫原性测定试剂盒，生物分析标志物测定试剂盒。KRISHGEN同时提供糖基化相关重组蛋白酶，去糖基化试剂盒，基因分型试剂盒等，应用于疾病研究、药物研发及分子诊断测试开发等领域。  

KRISHGEN BioSystems主要研究领域：

糖基化研究：糖苷酶，神经氨酸酶，去糖基化试剂盒

蛋白修饰酶：H1N1/H3N2/H4N6/H5N1-神经氨酸苷酶/唾液酸苷酶，蛋白酶，核酸酶

药代动力学试验PK：超全单抗药物分析试剂盒，ADA分析试剂盒

生物工艺残留：Coli/CHO/HEK-HCP宿主蛋白残留，DNA残留，Protein A残留

药物残留：多肽药物残留，抗生素残留

动物/人体健康研究指标，ELISA，试剂盒

KRISHGEN BioSystems部分研究工具：

# 名称 规格

KRI-KBBP01 KRIBIOLISA E.coli HCP ELISA 1x96wells

KRI-KBBP02 KRIBIOLISA Pichia Pastoris HCP ELISA 1x96wells

KRI-KBBP03 KRIBIOLISA CHO HCP ELISA 1x96wells

KRI-KBBP05 KRIBIOLISA SP 2/0 HCP ELISA 1x96wells

KRI-KBBP15 KRIBIOLISA HEK HCP ELISA 1x96wells

KRI-KBBP06 KRIBIOLISA Ovalbumin ELISA 1x96wells

KRI-KBBP07 KRIBIOLISA Human Serum Albumin ELISA 1x96wells

KRI-KBBP09 KRIBIOLISA Human IgA ELISA 1x96wells

KRI-KBBP10 KRIBIOLISA Bovine Serum Albumin ELISA * 1x96wells

KRI-KBBP11 KRIBIOLISA Protein A ELISA 1x96wells

KRI-KBBP12 KRIBIOLISA Protein A ELISA (natural & structurally conserved recombinant Protein A specific) 1x96wells

KRI-KBBR01 KRIBIOLISA E.coli Host Cell DNA Kit 100reactions

KRI-KBBR02 KRIBIOLISA CHO Host Cell DNA Kit 100reactions

KRI-KBBR03 KRIBIOLISA Insect Cell Host Cell DNA Kit 100reactions

艾美捷科技是KRISHGEN BioSystems的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/news/KRISHGEN-BioSystems-new.shtml

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艾美捷GroPep Bioreagents活性生长因子特色方案

艾美捷GroPep Bioreagents专注于细胞培养级的活性生长因子（主要集中在胰岛素样生长因子（IGF）领域）、抗体及相关蛋白试剂等研究领域。

GroPep Bioreagents研究热点：

Human LR3 IGF-I

Human IGF-I

Human IGF-II

Human L-EGF

Human IGFBP-3

GroPep Bioreagents人LR3 IGF-I（细胞培养级）详细信息：

来源 大肠杆菌（在无动物源培养基中生产）

分子量 9110道尔顿

纯度 ≥95%（SDS凝胶）

生物活性 通过CHO增殖系统，ED50:14ng-350ng/mL

内毒素水平 ≤0.1 EU/μg

外观 白色粉末

配方 在0.1M乙酸冷冻干燥，并在氮气下微真空下储存

储存/稳定性 未开封小瓶2-4°C条件下≥2年

培养检测 Biosensis/GroPep ELISA BEK-2233-1P/2P

GroPep的LR3 IGF-I有何特色？

GroPep的LR3 IGF-I由天然人IGF-1制成，第3位的氨基酸由Q取代R，并在N端加上13个氨基酸。LR3 IGF-I是一款IGF-I类似物，在体外和体内实验效果比天然IGF-I更有效，专门用于补充哺乳动物细胞培养物，以支持细胞的存活和增殖。

LR3 IGF-I在诱导存活和增殖效果比胰岛素更好。

LR3 IGF-I在比胰岛素或IGF-1低得多的浓度下有效。

LR3 IGF-I能够更好地刺激I型IGF受体，从而诱导更高水平的激活。

LR3 IGF-I可用于商业细胞培养生产和学术研究项目研究。

GroPep Bioreagents其它热门研究（部分）：

类别 名称 规格

IGF-I家族 Barramundi IGF-I (Lates calcarifer)尖吻鲈IGF-I 100ug

Biotinyl Human IGF-I生物素化的IGF-I 50ug

Bream IGF-I (Pagrus auratus)鳊鱼IGF-I 100ug

Chicken IGF-I鸡IGF-I 100ug

Human IGF-I (Media Grade)人IGF-I(细胞培养级) 100ug

Human IGF-I (Receptor Grade)人IGF-I(受体级别) 20ug

Rat IGF-I大鼠IGF-I 1mg

Tuna IGF-I (Thunnus maccoyii)金枪鱼IGF-I 100ug

IGF-II家族 Chicken IGF-II鸡IGF-II 100ug

Di-biotinyl Human IGF-II多生物素化的IGF-II 10ug

Human IGF-II (Media Grade)人IGF-II(细胞培养级) 100ug

Human IGF-II (Receptor Grade)人IGF-II(受体级别) 100ug

Human Pro-IGF-II (1 - 104)人Pro-IGF-II (1 - 104) 100ug

Mono-biotinyl Human IGF-II单生物素化的IGF-II 50ug

Rat IGF-II大鼠IGF-II 100ug

Salmon/Trout IGF-II (Oncorhynchus kisutch & Oncorhynchus mykiss)三文鱼/鳟鱼IGF-II（吻鲑和吻鲑） 100ug

艾美捷科技是GroPep Bioreagents的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/news/GroPep-new.shtml

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艾美捷Kingfisher Biotech各种兽医学动物模型解决方案

艾美捷Kingfisher Biotech以兽医学研究和人类疾病的动物模型为目标，致力于开发多个种属的试剂研究，Kingfisher Biotech所研究的物种多达60种研究动物。目前主要提供的动物物种，为牛，犬，山羊，鲶鱼，鸡，食蟹猴，海豚，马，猫，豚鼠，仓鼠，人，小鼠，绵羊，兔，大鼠，猪，火鸡，斑马鱼等。

Kingfisher Biotech针对各种兽医学动物模型，分为如下3类，：

重组蛋白（均为冻干粉形式）

抗体，尤其是CD系列流式抗体齐全

ELISA开发试剂盒（抗体对+抗原标准品）

Kingfisher Biotech热门研究：

# 名称 中文名称

WSC0825B-100 Anti-bovine IL-17A monoclonal antibody (clone Bo-IL-17A) 抗牛 IL-17A 单克隆抗体（克隆 Bo-IL-17A）

DIY0662B-004 BOVINE CXCL10 (IP-10) ELISA DIY Kit 牛 CXCL10 (IP-10) ELISA DIY 试剂盒

DIY0665B-003 BOVINE IFN GAMMA ELISA DIY Kit 牛 IFN GAMMA ELISA DIY 试剂盒

DIY0670B-003 BOVINE IL-6 ELISA DIY Kit 牛 IL-6 ELISA DIY 试剂盒

DIY0670B-004 BOVINE IL-6 ELISA DIY Kit 牛 IL-6 ELISA DIY 试剂盒

DIY0673B-003 BOVINE IL-17A ELISA DIY Kit 牛 IL-17A ELISA DIY 试剂盒

DIY0673B-004 BOVINE IL-17A ELISA DIY Kit 牛 IL-17A ELISA DIY 试剂盒

DIY0675B-003 BOVINE TNF ALPHA ELISA DIY Kit 牛 TNF ALPHA ELISA DIY 试剂盒

DIY0682D-003 CANINE TNF ALPHA ELISA DIY Kit 犬 TNF ALPHA ELISA DIY 试剂盒

DIY0684C-003 CHICKEN IFN GAMMA ELISA DIY Kit 鸡 IFN GAMMA ELISA DIY 试剂盒

DIY0696E-003 EQUINE CXCL10 (IP-10) ELISA DIY Kit 马 CXCL10 (IP-10) ELISA DIY 试剂盒

DIY0701E-003 EQUINE IL-4 ELISA DIY Kit 马 IL-4 ELISA DIY 试剂盒

DIY0715U-003 RABBIT IL-4 ELISA DIY Kit 兔 IL-4 ELISA DIY 试剂盒

DIY0723S-004 SWINE CXCL10 (IP-10) ELISA DIY Kit 猪 CXCL10 (IP-10) ELISA DIY 试剂盒

DIY0725S-003 SWINE IFN GAMMA ELISA DIY Kit 猪 IFN GAMMA ELISA DIY 试剂盒

DIY0726S-003 SWINE IL-4 ELISA DIY Kit 猪 IL-4 ELISA DIY 试剂盒

DIY0732S-003 SWINE TNF ALPHA ELISA DIY Kit 猪 TNF ALPHA ELISA DIY 试剂盒

DIY1043B-003 BOVINE LIF ELISA DIY Kit BOVINE LIF ELISA DIY 试剂盒

DIY1048Y-003 CYNOMOLGUS TNF ALPHA ELISA DIY Kit 食蟹猴 TNF ALPHA ELISA DIY 试剂盒

DIY1115C-004 CHICKEN IL-6 ELISA DIY Kit 鸡 IL-6 ELISA DIY 试剂盒

DIY1169Y-003 CYNOMOLGUS MONKEY IL-6 ELISA DIY Kit 食蟹猴 IL-6 ELISA DIY 试剂盒

DIY1491Y-003 CYNOMOLGUS MONKEY LIF ELISA DIY Kit 食蟹猴 LIF ELISA DIY 试剂盒

DIY1509B-003 BOVINE GM-CSF ELISA DIY Kit 牛 GM-CSF ELISA DIY 试剂盒

DIY1755V-003 OVINE IL-1 BETA ELISA DIY Kit OVINE IL-1 BETA ELISA DIY 试剂盒

DIY1813V-003 OVINE IFN GAMMA ELISA DIY Kit 绵羊 IFN GAMMA ELISA DIY 试剂盒

DIY1940Y-003 CYNOMOLGUS MONKEY GM-CSF ELISA DIY Kit 食蟹猴 GM-CSF ELISA DIY 试剂盒

PB0274B-100 Bovine IL-17A Polyclonal Antibody 牛 IL-17A 多克隆抗体

PBB0277B-050 Bovine IL-17A Polyclonal Antibody - Biotinylated 牛 IL-17A 多克隆抗体 - 生物素化

KP1041B-100 Bovine LIF Polyclonal Antibody 牛LIF多克隆抗体

KPB1042B-050 Bovine LIF Polyclonal Antibody - Biotinylated 牛 LIF 多克隆抗体 - 生物素化

KP1109B-100 Bovine IL-1 beta Polyclonal Antibody 牛 IL-1 beta 多克隆抗体

KPB1110B-050 Bovine IL-1 beta Polyclonal Antibody - Biotinylated 牛 IL-1 beta 多克隆抗体 - 生物素化

KP1560D-100 Canine LIF Polyclonal Antibody 犬LIF多克隆抗体

KPB1561D-050 Canine LIF Polyclonal Antibody - Biotinylated 犬 LIF 多克隆抗体 - 生物素化

RP0001B-100 Bovine IL-4 Recombinant Protein 牛 IL-4 重组蛋白

RP0004S-100 Swine CXCL10 Recombinant Protein 猪CXCL10重组蛋白

RP0014B-100 Bovine IL-6 Recombinant Protein 牛 IL-6 重组蛋白

RP0022E-100 Equine GM-CSF Recombinant Protein 马 GM-CSF 重组蛋白

RP0079B-025 Bovine CXCL10 Recombinant Protein 牛CXCL10重组蛋白

RP0103D-025 Canine IL-6 Recombinant Protein 犬IL-6重组蛋白

RP0110C-100 Chicken IL-4 Recombinant Protein 鸡IL-4重组蛋白

RP0128S-005 Swine IL-17A Recombinant Protein 猪IL-17A重组蛋白

RP0128S-025 Swine IL-17A Recombinant Protein 猪IL-17A重组蛋白

RP0290C-100 Chicken GM-CSF Recombinant Protein 鸡 GM-CSF 重组蛋白

RP0299C-100 Chicken IL-6 Recombinant Protein 鸡IL-6重组蛋白

RP0347P-005 Dolphin IL-1 beta Recombinant Protein 海豚 IL-1 beta 重组蛋白

RP0347P-025 Dolphin IL-1 beta Recombinant Protein 海豚 IL-1 beta 重组蛋白

RP0754D-100 Canine CXCL10 (IP-10)  Recombinant Protein 犬类 CXCL10 (IP-10) 重组蛋白

RP0918D-100 Canine GM-CSF  Recombinant Protein 犬GM-CSF重组蛋白

RP0920D-005 Canine IL-17A  Recombinant Protein 犬IL-17A重组蛋白

RP0920D-025 Canine IL-17A  Recombinant Protein 犬IL-17A重组蛋白

RP0997B-100 Bovine LIF  Recombinant Protein 牛LIF重组蛋白

RP1012S-100 Swine LIF  Recombinant Protein 猪LIF重组蛋白

RP1031Y-025 Cynomolgus Monkey IL-17A  Recombinant Protein 食蟹猴IL-17A重组蛋白

RP1031Y-100 Cynomolgus Monkey IL-17A  Recombinant Protein 食蟹猴IL-17A重组蛋白

RP1034Z-100 Zebrafish IL-4  Recombinant Protein 斑马鱼 IL-4 重组蛋白

RP1045Z-005 Zebrafish IFN gamma 1-2  Recombinant Protein 斑马鱼 IFN gamma 1-2 重组蛋白

RP1181Y-100 Cynomolgus Monkey CXCL10  Recombinant Protein 食蟹猴CXCL10重组蛋白

RP1188P-100 Dolphin CXCL10  Recombinant Protein 海豚CXCL10重组蛋白

RP1190V-100 Ovine GM-CSF  Recombinant Protein 绵羊 GM-CSF 重组蛋白

RP1207Z-025 Zebrafish IL-6  Recombinant Protein 斑马鱼 IL-6 重组蛋白

RP1395C-100 Chicken LIF  Recombinant Protein 鸡LIF重组蛋白

RP1428C-005 Chicken IL-17A  Recombinant Protein 鸡IL-17A重组蛋白

RP1428C-025 Chicken IL-17A  Recombinant Protein 鸡IL-17A重组蛋白

RPB1873C-010 Chicken GM-CSF Biotinylated  Recombinant Protein 鸡 GM-CSF 生物素化重组蛋白

RP1874BT-005 Bat GM-CSF  Recombinant Protein 蝙蝠 GM-CSF 重组蛋白

常见种属对应中英文：

牛（Bovine）、马（Equine）、猪（Swine）、鸡（Chicken）、犬（Canine）、猫（Feline）、火鸡（Turkey）、兔子（Rabbit）、海豚（Dolphin）、豚鼠（Guinea Pig）、绵羊（Ovine）、鲶鱼（Catfish）、猴子（Monkey）、斑马鱼（Zebrafish）、雪貂（Ferret）、山羊（Caprine）、鲑鱼（Salmon）、食蟹猴（Cynomolgus Monkey）、变色龙（Anole）.

艾美捷科技是Kingfisher Biotech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/news/Kingfisher-Biotech.shtml

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神经元逆行/顺行示踪：艾美捷Fluorochorome方案

艾美捷Fluorochorome致力于荧光染料的研究与开发，其Fluoro Gold（荧光金）自1985年推出以来被广泛应用，并有大量的参考文献。荧光金在紫外线激发下发金黄色光，特点是非常灵敏，不仅能标记胞浆，而且能很好地显示树突分枝，但核和核仁不染色；在胞体内分解慢，甚至在注射后存活2月标记强度仍无明显变化；比较耐紫外线的照射，褪色比较慢；可以经受许多组织学染色处理，因而可以和HRP、免疫组织化学等方法结合。同时，Fluorochrome公司还拥有高灵敏度的Fluoro-Gold抗体、以及 Fluoro-Ruby（红色荧光金）等等。

Fluorochorome Fluoro-Gold & Fluoro-Ruby ——神经元逆行/顺行示踪标准:

FluoroGold( 荧光金)，品名Fluoro-Gold，是使用超广泛、超有效的 神经元逆行示踪剂 ；

Fluoro-Gold( 荧光金)抗体是超有效的针对于荧光金的抗体，自Fluorochrome于1998年推出以来，它取得了非常好的成绩；

Fluoro-Ruby( 红色荧光金)是一种快速、灵敏、可靠且技术简单的荧光神经元顺行示踪剂，Fluoro-Ruby的使用于Fluoro-Gold基本相同，被认为是了不起的神经元顺行示踪剂 。

图1：成年小鼠腰椎脊髓的Fluoro-Gold(荧光金)染色图，在跟DAPI复染后，呈现出典型的荧光金柱状标记 

图2：伏隔核注射Fluoro-Gold(荧光金)后，用Fluoro-Gold(荧光金)抗体检测

图3：Fluoro-Ruby( 红色荧光金)染色结果

Fluorochorome热门研究：

名称 # 规格

Fluoro-Gold 20 mg FC10000 20mg

Fluoro-Gold 50 mg FC10001 50mg

Antibody to Fluoro-Gold One Vial FC20001 100ul

Antibody to Fluoro-Gold Two Vials FC20002 2x100ul

Fluoro-Ruby FC30001 30mg

Ki67 Antibody-W FC40001 200ul

GFAP Antibody -W FC50001 200ul

BrdU Antibody -W FC60001 200ul

艾美捷科技是Fluorochorome的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/news/Fluorochrome-n.shtml

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Fluorochrome（FC10000）荧光金说明书整理

艾美捷Fluorochrome荧光金背景：

荧光金的使用与其他荧光示踪剂基本相同。主要区别在于Fluoro Gold在注射后存活时间、浓度范围、组织治疗以及与其他组织化学技术的兼容性方面更为灵活。

储存和保质期：干燥的荧光金应保存在4摄氏度的不透光封闭容器中。正确储存，Fluoro Gold的保质期应超过一年。溶液中的染料也应保存在4摄氏度的不透光封闭容器中，在这种情况下，它将保持稳定至少六个月。

Vehicle：氟金可溶解在蒸馏水或0.9%盐水中，或用作0.2M中性磷酸盐缓冲液中的悬浮液。

染料浓度：氟金已在1-10%的浓度范围内成功使用。最初，建议浓度为4%。如果注射部位出现不希望的坏死，或标记过于强烈，则将浓度降低至2%溶液。如果需要使用更精确的测量，氟金的分子量为532.6道尔顿。

术后生存期

在两天到两个月的时间内观察到良好的逆行标记。生存期通常为三到五天。长的存活期增强了远端突起的填充，而不会使染料从细胞中扩散。

固定

几乎可以使用任何固定剂，或者不使用固定剂；经常使用含有4%甲醛的磷酸盐中性缓冲盐水。含有高浓度重金属（如锇、汞）的固定剂会熄灭荧光，而高浓度（超过1%）的戊二醛可能会增加背景荧光。

Fluorochrome荧光金（FC10000）组织化学处理：

含氟金的组织可根据几乎任何常见的组织学技术进行处理。这包括未固定组织的冷冻切片（10µm）、固定组织的冰冻切片（20µm）和从塑料（2-4µm）或石蜡（3-10µm）中嵌入的组织切下的薄片。固定组织的冰冻切片是最常用的。

组合方法

在处理的这一点上，可以进一步处理切片以获得第二标记，例如放射自显影、HRP

组织化学、免疫细胞化学、第二荧光示踪剂、荧光复染等。

安装、清理和滑盖

切片通常安装在涂有明胶的载玻片上，风干，浸入二甲苯中，并用非荧光DPX塑料安装介质覆盖。除非与第二种示踪剂不兼容，否则切片可以用分级醇脱水。如果荧光金与荧光免疫细胞化学结合，则将切片风干并直接用中性缓冲甘油（1:2）覆盖。

检查和摄影

荧光金可以使用宽带紫外激发滤光片在荧光显微镜下观察。当用中性pH缓冲液处理组织时发出金色，而当用酸性（例如pH 3.3）pH缓冲液加工组织时发出蓝色。它可以用数码或胶片拍摄（彩色打印使用Ektachrome 200-400 ASA胶片，黑白打印使用同等速度的胶片，例如Tri-X）。大多数曝光时间范围为10-60秒，取决于物镜放大率和标签强度。三十（30）秒曝光约为平均值。可以利用多次曝光同时可视化荧光金和另一种示踪剂。因此，UV将与亮场照射相结合，以在放射自显影中同时定位荧光金与HRP或银颗粒。类似地，蓝光激发可以组合起来，也可以可视化FITC的绿色发射颜色，而绿色激发光可以用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭（荧光复染剂）的红色发射颜色。

Fluorochrome荧光金（FC10000）其他信息：

对于通过微量注射器或微量移液管进行的压力注射，Fluoro Gold应溶解在蒸馏水中或0.9%盐水中。氟金也可用作2M中性磷酸盐缓冲液中的悬浮液，然而，悬浮颗粒可能会堵塞细的微量移液管尖端，因此蒸馏水或0.9%盐水是首选载体。对于离子电渗疗法，1%的氟金溶液在1M乙酸缓冲液（pH=3.3）中配制。清洁良好（95%ETOH，水）的玻璃微量移液管尖端应为10-20µm。最佳的离子电渗参数是在10-20分钟内用脉冲电流（4-10秒开启，4-10秒关闭）输送+1至+5u安培。

实际上，任何中枢或外周神经系统结构都可以注射Fluoro Gold进行逆行转运分析。在外周神经系统中，可以研究神经节和外周目标。对于周围神经的研究，应切断或损伤神经，并浸入或注射aq。5%氟金溶液。由于Fluoro Gold不会被完整的通过纤维显著吸收，因此纤维必须被切割或严重损坏才能吸收染料。

运输和生存时间

荧光金被用作逆行轴突示踪剂，尽管确实发生了正向轴突运输。应改变存活时间（特别是12小时-2天的短存活时间），以最大限度地提高所研究的特定神经元系统中的正迁移。对于逆行运输，存活时间应从4天到14天不等。大多数系统需要7到10天的时间，尽管长路径（如脊髓到脑干）和大型哺乳动物（如猫、猴子）的路径可能需要更长的生存时间（如14天）。此外，由于荧光金在逆行标记神经元内保持快速，几个月的存活时间也将产生极好的结果。对于离子电渗疗法，建议2-5天的存活时间。据估计，哺乳动物每天的运输量约为2厘米；冷气球慢一点

来源：https://www.amyjet.com/products/FC10000.shtml

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Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用方法

艾美捷Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的储存和制备：

您将在一个小药瓶中收到荧光金抗体。这是一种在兔体内培养的多克隆抗体。小瓶将含有约100µl的抗体溶液。您不会收到冷冻的抗体，但应立即冷冻并储存在寒冷（-20ºC）、黑暗、干燥的环境中。一旦溶液解冻以准备工作滴定度，不要再冷冻溶液。一台好的商用冰箱的冷冻部分，没有防冻功能，应该足够了。如果适当且连续冷冻，抗体溶液可储存长达一年。

抗体溶液应保持冷冻，直到可以使用。100µl抗体等分试样的稀释度为1/100。抗体可在BSA稀释剂（50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中进一步稀释1/50000至1/100000倍，以产生50ml至100ml的工作效价。这意味着你可以将收到的溶液稀释500至1000倍。

如果您使用Vector精英套件，这将治疗300至1000个切片。制备后，抗体溶液可在凉爽（4ºC）、黑暗和干燥的环境中储存长达七天。好的商用冰箱的冰箱部分应该足够了。不建议在配制后七天内使用该溶液。

Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用：

氟金可以用几种不同的方法注射，包括压力法、离子电渗法和各种研究人员开发的其他应用。参见Schmued和Fallon，Fluoro-Gold：“一种具有众多独特财产的荧光逆行轴突示踪剂”，《大脑研究》，377（1986）147-154，以及Pieribone和Aston-Jones，“荧光金在深部脑核传入研究中的离子导入应用”，《脑研究》，475（1988）259-271。许多研究人员开发了自己的改进程序。抗体的使用不应依赖于使用荧光金的方法。

注射Fluoro Gold后，将漂浮切片（使用了灌注了4%甲醛的大鼠的30μm切片）与Fluoro金抗体溶液在4℃下孵育过夜。将切片清洗，然后在生物素化GAR（Vector Labs）中以1/1000在室温下孵育1小时，然后再次清洗。然后将切片在Avidin/Biotin（Vector Labs）中以1/1000孵育1小时，洗涤并转移至二氨基联苯胺（.04%）和氯化镍（2.5%）中的0.1M乙酸钠和0.06%H2O2中6分钟。然后清洗、安装、干燥、脱水并盖上盖子。

根据经验，如果按照上述方式储存和制备，如果您使用Vector精英试剂盒，每小瓶抗体应处理300至1000个30μm的白化大鼠脑（或类似大小的动物）切片。然而，您应该尝试集中注意力和程序，以确定哪一个最适合您的环境。

荧光金(Fluoro-Gold)抗体根据不同规格分为单管和二管：

荧光金抗体-单管/100ul（FC20001）

荧光金抗体-2管/2x100ul（FC20002）

来源：https://www.amyjet.com/featured/Fluorochrome-Fluoro-Gold.shtml

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艾美捷Fluorochrome Ki67抗体操作注意事项

艾美捷Fluorochrome Ki67抗体（FC40001）背景：

Ki67是正在进行的细胞增殖的内在标志物，存在于细胞周期的所有活性阶段（G1-M）。这种抗体是多克隆的，在兔体内被培养成人肽序列TPKEKAQALEDLAGFKLFQT，该序列在注射到兔体内之前通过戊二醛与甲状腺球蛋白偶联。该抗体已用于大鼠和人脑组织的免疫细胞化学。小瓶在1/100的稀释度下含有约200ul。抗体可在BSA稀释剂（50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中进一步稀释至至少1/20000。抗体应储存在-20℃。还包括用特定肽吸收的滤纸，用于阻断。可将500ul稀释的抗体添加到管中以实现10uM的阻断。在室温（RT）下孵育至少1小时，然后施用于组织。抗体与该肽特异性阻断，而不与滤纸上吸收的其他肽阻断。

Fluorochrome Ki67抗体（FC40001）基本操作：

新鲜冷冻的10-30微米切片在室温下在4%多聚甲醛（FA）中固定1小时，在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中洗涤，然后在90%的温度下在10%柠檬酸钠中处理40分钟。将切片在柠檬酸钠溶液中冷却20分钟，在PBS中洗涤，并用PBS中的0.1-0.3%H2O2孵育10至30分钟。再次在PBS中洗涤组织，然后用Avidin/Biotin阻断试剂盒（Vector cat#SP-2001）处理，在RT下洗涤并用BSA稀释剂孵育1小时。在RT下将Ki67抗体（1/20000）施加到组织上过夜。在PBS洗涤后，将切片在生物素化GAR中以1/1000（Vector labs cat#BA1000）在RT下孵育1个小时，洗涤，然后在阿维丁/生物素（Avidin/Biotin）中以1/1000（Vector labs cat#PK6100）在室温下孵育1小时。洗涤后，用二氨基联苯胺（0.04%）在0.1M乙酸钠中与0.06%H2O2混合六分钟（也可以加入2.5%的氯化镍）观察信号。然后对切片进行水洗（如果需要，进行复染）、脱水并盖上盖子。

该抗体也适用于Fluorochrome的BRDU抗体可视化方案。可以使用4%FA灌注组织代替新鲜冷冻切片。

保存建议：

小瓶中含有约200微升1/100稀释液。 抗体可在BSA稀释液（50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中进一步稀释至至少1/20，000。 抗体应在-20 ℃下储存。 还包括吸附有用于封闭的特异性肽的滤纸。 可向管中加入500 μ l稀释的抗体以获得10 μ M阻断。 应用于组织前，在室温（RT）下孵育至少1小时。 抗体特异性地与该肽阻断，而不与吸附在滤纸上的其他肽阻断。

Ki67抗体（FC40001）出版物：

Perez et al, The Journal of Neuroscience, May 13, 2009:29(19):6379-6387

Garcia-Fuster et al, in preparation: Individual differences in adult hippocampal neurogensis following experimenter administration of cocaine.

来源：https://www.amyjet.com/products/FC40001.shtml

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钙网蛋白（CRT）单克隆抗体（ADI-SPA-601PE-D）方案

艾美捷钙网蛋白（CRT）单克隆抗体（ADI-SPA-601PE-D）背景：

多功能、多区室蛋白钙网蛋白（Crt）可作为新的或错误折叠的蛋白质的可溶性分子伴侣，以及Ca2+结合蛋白。Crt 表达在 ER 管腔中最为丰富，也发生在其他膜结合细胞器、细胞表面和细胞外。Crt 也称为 CRP-55、钙调节蛋白和 HACBP（高亲和力钙结合蛋白），含有 ER 检索序列 KDEL，是 ER 膜蛋白钙连接蛋白 （Cnx） 的可溶物。Crt 的三个结构域包括一个 180 个残基 N 末端结构域、一个富含脯氨酸的 Pdomain 残基 189 -288），它以高亲和力结合 Ca2+ 并与 Cnx 和 calmegin 共享同源性，以及一个 110 个残基 C 末端结构域，它以低亲和力但高容量结合 Ca2+。P结构域可能与硫醇还原酶共伴侣ERp57（Grp58）相互作用。P结构域的NMR结构由一个延伸的发夹组成，该发夹似乎从Crt核心结构域形成弯曲的突起。Crt 及其膜结合的同系物 CNX 都与具有单葡萄糖基化 N-糖的蛋白质和糖蛋白相互作用。Crt/Cnx循环促进正确折叠，抑制折叠中间体的聚集，阻止过早寡聚化，调节ER降解，并防止不完全折叠的糖蛋白退出高尔基体复合物。CRT 似乎也可作为系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、乳糜泻、完全性先天性心脏传导阻滞和氟烷肝炎的自身抗原发挥作用。Crt 的多种附加功能包括粘附、血液功能以及心脏和神经元发育基因表达。

钙网蛋白（CRT）单克隆抗体（ADI-SPA-601PE-D）基本参数：

克隆： FMC 75

宿主： 鼠

同种型： 免疫球蛋白G1

免疫原： 重组钙网蛋白。

源： 从腹水中净化

物种反应性： 人类

猴子

应用： 流式细胞术

推荐稀释度/条件： 流式细胞术 （1：100）

建议的稀释度/条件可能不适用于所有应用。

应用说明： 预测分子量为~63kDa。

纯度细节： 蛋白G亲和纯化。

配方： 液。在PBS中，pH 7.2，含有0.09%叠丨氮丨化钠。

处理： 避免冻融循环。避光。

航运： 蓝冰不结冰

长期储存： +4°C

钙网蛋白（CRT）单克隆抗体部分文献引用：

CD47 Blockade Leads to Chemokine-Dependent Monocyte Infiltration and Loss of B Cells from the Splenic Marginal Zone: Y. Y. Yiu, et al.; J. Immunol. 208, 1371 (2022), Abstract;

IMMUNEPOTENT CRP induces DAMPS release and ROS-dependent autophagosome formation in HeLa and MCF-7 cells: A.C. Martinez-Torres, et al.; BMC Cancer 20, 647 (2020), Abstract; Full Text

Programmed cell removal by calreticulin in tissue homeostasis and cancer: M. Feng, et al.; Nat. Commun. 9, 3194 (2018), Abstract; Full Text

The novel immunomodulator IMMUNEPOTENT CRP combined with chemotherapy agent increased the rate of immunogenic cell death and prevented melanoma growth: M.D.C. Rodriquez-Salazar, et al.; Oncol. Lett. 14, 844 (2017), Abstract; Full Text

Human CD1c(+) DCs are critical cellular mediators of immune responses induced by immunogenic cell death: S. Di Blasio, et al.; Oncoimmunology 5, e1192739 (2016), Abstract; Full Text

来源：https://www.amyjet.com/products/ADI-SPA-601PE-D.shtml