产品介绍
本实验室现提供DNA荧光定量PCR(绝对定量),mRNA荧光定量PCR(绝对定量),mRNA荧光定量PCR(相对定量)技术服务。详情请来电咨询:13661449330,宋老师
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实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光试剂,利用荧光信号实时检测PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR能够专一、灵敏、快速、高重复性地精确定量起始模板浓度。但是就成熟的microRNA而言,由于其是由21-25个核苷酸组成的小RNA,长度太短,并不能通过传统的实时定量PCR进行检测,但是通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,配合实时定量PCR引物及探针可以精确检测微量样品中microRNA表达水平,也可以用终点PCR法定性检测。
客户样本要求:Genebank的ID号和研究内容的背景文献资料,若需检测基因的特定区域,请注明。提供实验所需的足够量的新鲜样品(组织块50mg以上,EDTA抗凝全血3ml以上,细胞数10/6个以上。
本公司绝对定量标准品使用含待测DNA的T载体克隆质粒,标准品使用3-5个点浓度,保证标准曲线R/2>0.99.所有样本及标准品均设置3个反应复孔。荧光定量PCR绝对定量不使用持家基因作内参。若有其它需求,如需使用其它类型标准品,使用持家基因为内参等请注明。
报告结果:基因克隆菌种(1ml菌液,试管中20%甘油保存),样本基因考贝数,标准曲线。
标本保存:标本保存于-80度,运输采用0度冰壶。
microRNA 实时定量PCR检测系统,相对其它microRNA检测技术有以下优点:
1.高特异性 , 可以只对成熟 microRNA 进行定量,有效区分成熟 microRNA 分子和前体分子
以及其它成熟microRNA 的同源分子;
2.快速,简单,省时,整个操作只需两步,不到 3 个小时,即可获得高质量的数据;
3.检测灵敏度高,样品消耗少,仅需 1-10ng 的总 RNA 或 50pg 左右的 microRNA ;
4.超宽的线性范围,可跨越 7 个数量级;